如果病人出现前述症状，则是比较典型的甲状旁腺功能亢进，经过化验检查和x线拍片可以确定诊断。病人血液中钙浓度增高、常大于2.6毫摩尔/升。因血钙浓度会波动，需作多次化验。血磷浓度降低。血碱性磷酸酶增高，甲状旁腺激素浓度升高。尿液中钙、磷排出量明显增多。x线拍片可以见到指骨骨膜下骨皮质吸收、纤维囊性骨炎及病理性骨折等。
在确定为甲状旁腺机能亢进后，还要对甲状旁腺病变进行定位。极少数病人在颈部可以摸到包块。颈部超声波检查，同位素扫描对肿瘤的定位准确性较高，颈部cT检查有很大价值。术前不能定位时也可在手术中探查甲状旁腺，以确定病变部位。
