(1)体内宫颈粘液功能检查：性交后试验，用以检查宫颈粘液功能、精子成活率和穿透力。

    于卵泡晚期或排卵期宫颈粘液评分功能良好时进行，试验前禁欲并避免阴道灌洗3天，性交后2～5小时来诊，擦净阴道后穹窿和宫颈外口的分泌物，用宫颈吸管或妇科长钳深入宫颈管内1．5cm，采取粘液后涂于玻片上镜检。每一玻片观察3～5个视野并计数活动精子数目。每高倍视野下>20个活动精子为最好；6～20个活动精子为良好；l～5个活动精子属尚好；仅有少数活动精子或无精子为差，提示PcT试验阴性，为宫颈性不孕。一次检查不能确诊，应重复检查两个月经周期然后作出判断。可能造成PcT试验阴性的因素包括：①选择PcT时间不当：如在卵泡早期或黄体期由于低雌激素影响造成；②宫颈炎症由于炎性细胞和炎性介质可增加宫颈粘液的粘稠度，pH值降低而不利于精子的成活和穿透；③免疫抗体：宫颈粘液中存在抗精子抗体；④子宫位置异常：如严重的前倾前屈或后倾后屈，使后穹窿池不能储存精液和精子；⑤宫颈解剖异常：如宫颈狭窄、延长、疤痕等；⑥男性因素：如无精症、少精症、逆行射精、尿道下裂、阳萎等；⑦应用克罗米芬(CC)、三苯氧胺等抗雌激素药物可使宫颈粘液变粘稠。

    (2)体外精子一宫颈粘液接触试验：了解宫颈粘液中有无抗精子抗体。试验在预测的排卵期进行，常用方法为玻片法：将精液和粘液各一滴滴于玻片上，相距2～3mm，轻摇玻片使两滴液体靠近，放置盖玻片后镜检。如两者相容，精液界面将向粘液界面侧侵入，活动精子呈扇形进入宫颈粘液中为正常反应，提示宫颈粘液中无抗精子抗体。如两者不相容，则精子不能进入宫颈粘液中。

    (3)生殖免疫学检查：包括精子抗原、抗精子抗体、抗子宫内膜抗体的检查，有条件可进一步做体液免疫学检查，包括cD50，IgG，IgA，IgM等。

    血内抗精子抗体的检测：既往常用精子凝集试验和精子制动试验。两者均用不孕女方和正常对照的血清加稀释的精子。前者是观察精子的凝集情况，如果精子结合了抗体则互相凝集，所以有凝集者为阳性，此法敏感性强，特异性差，假阳性发生率高；后者是再加入适量的补体后观察精子的活动情况，如果精子结合了抗体，在补体的协同作用下，精子制动甚至死亡，显微镜下观察精子不能向前运动为阳性，此法特异性强，重复性好，敏感性差，假阴性发生率高；目前常用酶联免疫吸附法，既用精子包被塑料板，加待测标本加酶标记二抗底物，根据显色情况判断结果，为半定量，可以批量操作，如果用可溶性精子膜抗原包被，则更特异、更敏感，并能定性定量测定抗体类型。

    宫颈粘液精子抗体的测定：应用生物素一亲和素酶联免疫吸附来测定宫颈粘液精子抗体方法可靠，是一种新一代的定量测定方法。

    抗透明带抗体测定：用问接免疫荧光法或ELISA法，利用猪透明带与人有交又抗原的特点，用猪透明带抗原检测人血清透明带抗体。

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